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详细说明

乙型脑炎病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

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产品简介


【产品名称】

通用名称:康珠生物乙型脑炎病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名称:Japanese encephalitis virus IgG antibody detection kit (ELISA)


【包装规格】

96人份/盒 48人份/盒。


【预期用途】

本产品用于体外定性检测人体血清、血浆或指尖末梢血中的乙型脑炎病毒IgG抗体。

流行性乙型脑炎是乙型脑炎病毒经库蚊传播而使人体感染的一种传染性疾病,感染患者以2-6岁儿童居多,病死率较高为5%-20%。人体感染该病毒后,能引起中枢神经系统症状,发生脑炎而俗称乙型脑炎,应用乙型脑炎抗体的稳定,很少变异的特点。预防免疫效果良好,所以通过免疫接种乙型脑炎病毒疫苗,使机体产生乙型脑炎病毒IgG抗体,达到乙型脑炎的预防效果。

商品参数

【检验原理】

本试剂盒采用酶联免疫间接法原理,用经灭活纯化的乙型脑炎病毒抗原包被酶标板制备固相抗原,样本中乙型脑炎病毒IgG抗体与包被抗原反应,再与辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG结合形成抗原-抗体-酶标抗体复合物,加入底物TMB后产生显色反应,加入终止液后经酶免分析仪测定OD值,再与临界值比较以判定样本中是否含有乙型脑炎病毒IgG抗体。


【主要组成成份】

本试剂盒由反应板、酶结合物、阳性对照、阴性对照、浓缩洗涤液、显色液A、显色液B、终止液、样品稀释液、自封袋和封片组成:

序号

组份名称

主要组成成份

装量

96人份/盒

48人份/盒

1

反应板

包被有乙型脑炎病毒抗原

1(96孔)

1(48孔)

2

酶结合物

HRP-鼠抗人IgG

1(6.0ml)

1(3.0ml)

3

阳性对照

含乙型脑炎病毒IgG抗体阳性血清

1(0.5ml)

1(0.3ml)

4

阴性对照

含乙型脑炎病毒IgG抗体阴性血清

1(0.5ml)

1(0.3ml)

5

浓缩洗涤液

含磷酸盐

1(40ml)

1(20ml)

6

显色液A

含过氧化脲

1(6.0ml)

1(3.0ml)

7

显色液B

TMB

1(6.0ml)

1(3.0ml)

8

终止液

含硫酸

1(6.0ml)

1(3.0ml)

9

样品稀释液

含小牛血清

1(12ml)

1(6ml)

10

自封袋

——

1

1

11

封片

——

3

3


【储存条件及有效期】

试剂盒应置28℃保存,有效期为十二个月。

生产日期、有效期至:见包装标签。


【适用仪器】

酶免分析仪(检测波长450nm,参考波长630nm)、洗板机、37℃恒温水浴箱、移液器、振荡器。


【样本要求】

1. 血清样本按常规方法由静脉采集。血浆样本可采用常规用量的抗凝剂(EDTA-2Na: 12g/L、肝素:15000IU/L、枸椽酸钠:3.2g/L、草酸钠: 0.01mol/L1.34g/L))抗凝。

2.样本应新鲜,避免反复冻溶及溶血。样本可在2-8℃保存一周,长期保存应于-20℃条件下储存。

3.指尖末梢血样本按照常规方法采集,指尖末梢血样本可采用常规用量的抗凝剂(EDTA-2K)抗凝。指尖末梢血样本取20µL加入样本稀释液120µL,静置取上清液。


【检验方法】

加样:加血清或血浆样本时每孔先加入样本稀释液100µL,再加入待测样本10µL,轻轻振匀。或者加指尖末梢血样本时,取20µL加入样本稀释液120µL,轻摇混匀,置室温或28℃冰箱静置,待红血球全部沉降到管底后取上清液进行检测,每孔加入上清液100µL,轻轻振匀。

每次试验设阴性对照、阳性对照各2孔,每孔加入相应对照血清100微升,并设空白对照1(暂不加任何液体)

2.温育:用封片封板后,37℃温育60分钟。

3.洗板:将浓缩洗涤液用纯化水或双蒸水稀释20倍,设定洗板5次程序,每次浸泡时间为(3060)秒,洗板结束后在吸水纸上拍干。

4.加酶:除空白对照孔外,每孔加入酶结合物50微升。

5.温育:用封片封板后,37℃温育30分钟。

6.洗板:同步骤3

7.显色:每孔加入显色液A、显色液B50微升,用封片封板后,轻轻振匀,37℃避光显色15分钟。

8.终止:每孔加终止液50微升,轻轻振匀。

9.OD值:对空白对照调零,在酶标仪450nm处测定OD值,或在双波长450nm/630nm处测定OD值。

10.结果分析:当使用单波长(450nm)测定时应扣除空白值,当使用双波长测定不应扣除空白值。

【参考值(参考范围)】

临界值 cutoff value=0.10+阴性对照平均值(不到0.050.05算,超过0.05按实际值平均值计算。)


【检验结果的解释】

样本OD值<临界值时,为阴性结果:表示待测样本中未检出乙型脑炎病毒IgG抗体;

样本OD值≥临界值时,为阳性结果:表示待测样本标本中检出乙型脑炎病毒IgG抗体,说明既往感染或已经过乙型脑炎疫苗的计划免疫。


【检验方法的局限性】

1.高灵敏度的免疫实验方法,存在潜在的非特异性反应。

2.检测高度溶血的样本和有微生物污染的样本时可能会有错误的结果。

3.本检测结果仅供临床参考,如需确诊病例请结合临床症状及其他检测手段,不得作为临床诊断的唯一标准

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